Ụkpụrụ na ụzọ nyocha ọnụọgụgụ nke Liquid Chromatography

Usoro nkewa nke chromatography mmiri na-adabere na ọdịiche dị na mmekọrịta nke ihe ndị dị na ngwakọta maka akụkụ abụọ ahụ.

Dị ka usoro dị iche iche guzoro siri dị, chromatography mmiri mmiri na-ekewa n'ime chromatography mmiri siri ike, chromatography nke mmiri-mmiri na chromatography oge jikọtara ọnụ.Ndị a na-ejikarị eme ihe bụ chromatography mmiri siri ike nwere silica gel dị ka filler na chromatography nke jikọtara ya na microsilica dị ka matrix.

Dị ka ụdị nke na-akwụsị akwụsị, chromatography mmiri mmiri nwere ike ikewa na kọlụm chromatography, akwụkwọ chromatography na mkpa oyi akwa chromatography.Dị ka ike adsorption, ọ nwere ike kewaa adsorption chromatography, nkebi chromatography, ion mgbanwe chromatography na gel permeation chromatography.

N'ime afọ ndị na-adịbeghị anya, a na-agbakwunye usoro mmiri mmiri dị elu na usoro chromatography nke kọlụm mmiri iji mee ka usoro mkpanaka na-agba ọsọ ngwa ngwa n'okpuru nrụgide dị elu iji meziwanye mmetụta nkewa, ya mere nnukwu arụmọrụ (nke a makwaara dị ka nnukwu nrụgide) chromatography mmiri mmiri. aputala.

IKPEHE
01 Ụkpụrụ nke nyocha ọnụọgụgụ nke chromatography Liquid

Iji nyochaa na ndabere nke qualitative, a chọrọ ihe dị ọcha dị ka ụkpụrụ;

Nchọpụta chromatography nke mmiri mmiri bụ usoro ọnụọgụ dịtụ: ya bụ, ọnụọgụ nke nyocha dị na ngwakọta a na-eme atụmatụ site na ọnụọgụ ama ama nke ọkọlọtọ ọkọlọtọ dị ọcha.

IKPEHE
02 ndabere maka nha site na Liquid Chromatography

Ọnụ ọgụgụ nke akụrụngwa a tụrụ atụ (W) dabara na uru nzaghachi (A) (elu elu ma ọ bụ mpaghara kacha elu), W = f × A.

Quantitative correction factor (f): Ọ bụ nha nhata nke usoro ngụkọ ọnụọgụgụ, na ihe ọ pụtara n'anụ ahụ bụ ọnụọgụ nke akụrụngwa atụpụtara site na uru nzaghachi nkeji (mpaghara elu).

Enwere ike nweta ihe ngbanwe ọnụọgụ site na ọnụọgụ ọkọlọtọ amaara na uru nzaghachi ya.

Tulee uru nzaghachi nke akụrụngwa amaghi ama, yana ọnụọgụ nke akụrụngwa nwere ike nweta site na ihe ngbanwe ọnụọgụ.

IKPEHE
03 Okwu a na-ahụkarị na nyocha ọnụọgụgụ

Ihe nlele (ihe nlele): ngwọta nwere nyocha maka nyocha chromatographic.Kewara n'ime ọkọlọtọ ọkọlọtọ na amaghi ama.

Ọkọlọtọ: Ngwaahịa dị ọcha nwere ntinye ama ama.Ihe nlele amaghi ama (amaghị): Ngwakọta nke a ga-anwale itinye uche ya.

Nlereanya arọ: Ntụle izizi nke nlele a ga-anwale.

Dilution: Ihe dilution nke ihe nlele amaghi ama.

Akụkụ : ọnụ ọgụgụ kacha elu chromatographic ka a ga-enyocha n'ụzọ ole na ole, ya bụ, nyocha nke amaghị ọdịnaya ya.

Ọnụ ego nke akụrụngwa (ego): ọdịnaya (ma ọ bụ itinye uche) nke ihe a ga-anwale.

Integerity : Usoro mgbakọ na mwepụ nke iji kọmpụta tụọ mpaghara kacha elu nke chromatographic elu.

Usoro nhazi nhazi: Usoro ahịrị ahịrị nke akụrụngwa yana uru nzaghachi, ewepụtara site na ọnụọgụ ọkọlọtọ amaara, ejiri iji chọpụta ọdịnaya amaghi ama nke nyocha.

IKPEHE
04 Nyocha ọnụọgụ nke Chromatography Liquid

1. Họrọ usoro chromatographic kwesịrị ekwesị maka nyocha ọnụọgụgụ:

l Kwado ọnụ ọgụgụ kacha elu nke akụrụngwa achọpụtara wee nweta mkpebi (R) karịa 1.5

l Kpebie nkwekọ (ịdị ọcha) nke ọnụ ọgụgụ chromatographic nke ihe ndị a nwalere

l Kpebie njedebe nchọpụta na njedebe nke usoro;sensitivity na linear nso

2. Mepụta usoro nhazi nke nwere ọkọlọtọ ọkọlọtọ nke ntinye uche dị iche iche

3. Lelee izi ezi na izi ezi nke ụzọ ọnụọgụ

4. Jiri sọftụwia njikwa chromatography kwekọrọ ekwekọ iji mejuputa mkpokọta nlele, nhazi data na kọwapụta nsonaazụ

IKPEHE
05 Nchọpụta ọnụ ọgụgụ kacha elu (qualitative)

Jiri nke ọma chọpụta ọnụ ọgụgụ chromatographic ọ bụla ka a ga-agụta

Nke mbụ, jiri ihe atụ ọkọlọtọ iji chọpụta oge njide (Rt) nke ọnụ ọgụgụ kacha elu chromatographic ga-agụta.Site n'ịtụle oge njide, chọta akụrụngwa dabara na ọnụ ọgụgụ kacha elu chromatographic ọ bụla na nlele amabeghị.Usoro qualitative chromatographic bụ iji oge njide tụnyere ọkọlọtọ ọkọlọtọ.Ngosipụta ezughị okenkwenye ọzọ (qualitative)

1. Usoro mgbakwunye ọkọlọtọ

2. Jiri ụzọ ndị ọzọ n'otu oge: ụzọ ndị ọzọ chromatographic (gbanwee usoro, dị ka: iji dị iche iche chromatographic ogidi), ndị ọzọ nchọpụta (PDA: spectrum ntụnyere, ụdịdị n'ọbá akwụkwọ search; MS: mass spectrum analysis, spectrum library search)

3. Ngwa na ụzọ ndị ọzọ

IKPEHE
06 Nkwenye nke ọnụ ọgụgụ kacha elu

Kwenye nkwekọ kachasị elu chromatographic (ịdị ọcha)

Gbaa mbọ hụ na enwere naanị otu ihe atụpụtara n'okpuru ọnụ ọgụgụ chromatographic ọ bụla

Lelee maka ndabichi sitere na ihe ndị na-ekpochapụ ihe (adịghị ọcha)

Ụzọ maka nkwenye nke Chromatographic Peak Consistency (Ịdị Ọcha)

Tụnyere Spectrograms na Photodiode Matrix (PDA) Nchọpụta

Nchọpụta ịdị ọcha kacha elu

2996 Ozizi akụkụ ịdị ọcha

Ụzọ ọnụọgụgụ a na-ejikarị na PART 07

Usoro okirikiri ọkọlọtọ, kewara n'ime usoro ọkọlọtọ mpụga na usoro ọkọlọtọ ime:

1. Usoro ọkọlọtọ mpụga: nke a na-ejikarị na chromatography mmiri mmiri

A na-akwado usoro ihe atụ ọkọlọtọ nke mkpokọta ama ama site na iji ihe nlele dị ọcha nke ogige a ga-anwale dị ka ọkọlọtọ ọkọlọtọ.agbanyere n'ime kọlụm ruo uru nzaghachi ya (mpaghara kacha elu).
N'ime mpaghara ụfọdụ, enwere mmekọrịta dị mma n'etiti ntinye nke ọkọlọtọ ọkọlọtọ na uru nzaghachi, ya bụ W = f × A , na a na-eme usoro nhazi.

N'okpuru otu ọnọdụ nnwale ahụ, gbanye ihe nlele amabeghị iji nweta uru nzaghachi nke akụrụngwa a ga-atụ.Dị ka ọnụ ọgụgụ a maara nke ọma f, enwere ike ịnweta ntinye nke akụrụngwa a ga-atụle.

Uru nke usoro ọkọlọtọ mpụga:ọrụ dị mfe na ngụkọ, ọ bụ usoro ọnụọgụgụ a na-ejikarị;ọ dịghị mkpa ka a chọpụta akụrụngwa ọ bụla na eluted;ọkọlọtọ ọkọlọtọ chọrọ;ọnọdụ nha nke ọkọlọtọ ọkọlọtọ na amaghi ama kwesịrị ịdị na-agbanwe agbanwe;olu ogwu ogwu kwesiri ibu nke oma.

Ọdịmma nke usoro ọkọlọtọ mpụga:A na-achọ ka ọnọdụ nnwale ahụ dị elu, dị ka nghọta nke onye na-achọpụta ihe, ọnụego na-agba ọsọ, na ihe mejupụtara nke usoro mkpanaka enweghị ike ịgbanwe;olu nke ọ bụla injection kwesịrị inwe ezigbo repeatability.

2. Usoro ọkọlọtọ dị n'ime: ezi, ma na-enye nsogbu, nke a na-ejikarị na usoro ọkọlọtọ

A na-agbakwunye ọnụ ọgụgụ a maara nke ụkpụrụ dị n'ime na ọkọlọtọ iji mee ka ọ bụrụ ihe mgbagwoju anya, na-akwadokwa usoro ọrụ nke ntinye uche mara.Oke molar nke ọkọlọtọ na ọkọlọtọ ime n'ọkọlọtọ agwakọtara ka agbanwebeghị.Tinye n'ime kọlụm chromatographic wee were (ọkọlọtọ sample mpaghara kacha elu/n'ime ọkọlọtọ sample mpaghara) dị ka nzaghachi uru.Dị ka njikọ njikọ dị n'etiti uru nzaghachi na ntinye uche nke ọkọlọtọ ọrụ, ya bụ W = f × A, a na-eme ka ọkpụkpụ ọkọlọtọ.

A na-agbakwunye ọnụọgụ ọkọlọtọ amaara nke ọma na nlele amabeghị wee tinye ya na kọlụm iji nweta uru nzaghachi nke akụrụngwa a ga-atụ.Dị ka ọnụ ọgụgụ a maara nke ọma f, enwere ike ịnweta ntinye nke akụrụngwa a ga-atụle.

Njirimara nke usoro ọkọlọtọ ime:N'oge a na-arụ ọrụ, a na-agwakọta ihe atụ na ụkpụrụ dị n'ime ma tinye ya n'ime kọlụm chromatographic, ma ọ bụrụhaala na ọnụọgụ nke ihe a tụrụ atụ na ụkpụrụ dị n'ime n'ime ihe ngwọta agwakọta na-agbanwe agbanwe mgbe niile, mgbanwe nke olu nlele. agaghị emetụta ọnụọgụ ọnụọgụgụ..Usoro ọkọlọtọ dị n'ime na-ewepụ mmetụta nke olu sample , na ọbụna usoro mkpanaka na onye nchọpụta, ya mere ọ dị mma karịa usoro ọkọlọtọ mpụga.

IKPEHE
Ihe 08 na-emetụta nsonaazụ nyocha ọnụọgụgụ

Enwere ike ịkpata izi ezi adịghị mma site na:

Mwekota ọnụ ọgụgụ kacha elu na-ezighi ezi, ire ere ma ọ bụ adịghị ọcha ewepụtara n'oge nkwadebe sample, vial adịghị emechi, ihe nlere ma ọ bụ ihe mgbaze, nkwadebe nlele na-ezighi ezi, nsogbu injection sample, nkwadebe ọkọlọtọ n'ime ezighi ezi.

Ihe nwere ike ime maka adịghị mma:

Mwekota kacha elu na-ezighi ezi, ntụtụ ma ọ bụ nsogbu injector, ire ere ma ọ bụ adịghị ọcha ewepụtara n'oge nkwadebe nlele, nsogbu chromatographic, nzaghachi onye nchọpụta rụrụ arụ.